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Intro ......

 

시험관속의 배양한 균을 관찰해 보았는데 지그재그 모양으로 배양 되지 않고 지그재그 선이 끊겨서 따로따로 조금씩 배양되어 있었다. ㉢진탕배양법(shaking culture) 각종 배양병에 배지를 넣고 (500㎖ 배양병에 배양액은 100㎖ 이하) 이식후 배양기의 진탕기에 넣어 배양한다. 이것을 적온의 배양기 속에 넣어 1~3일이 되면 집락이 발생한다. ㉢진탕배양법(shaking culture) 각종 배양병에 배지를 넣고 (500㎖ 배양병에 배양액은 100㎖ 이하) 이식후 배양기의 진탕기에 넣어 배양한다. (토의) ●고체 배양법 ㉠사면배양법(slant culture) 사면배지에 분리한 미생물을 백금선을 사용하여 한천표면의 아래서 위로 선을 긋는다. 또한 시험관의 오염을 막기 위해서 시험관 입구와 면전을 화염살균하였는데 살균을 하고 나서도 입구을 손으로 만져 다시 화염살균을 하기도 하였다. ㉡천자배양법(stab culture) 미생물의 생리적 특성(SIM배지에서 Indole이나 황화수소 생성)을 조사할 경우 부분적인 혐기조건을 만들어 주거나 생성된  ......

 

 

Index & Contents

(미생물학실험)미생물 사면배양법

 

시험관에 배지을 만들어 미생물을 배양하는 실험을 하였다. 처음 해야 할 과정은 auto clave에서 배양할 시험관을 소독하고, 조원 6명을 기준으로 agar 2.76g을 120ml증류수에 녹여 살균소독 하는 것이다.

 

(실험결과):이번 실험은 시험관에 배지을 만들어 미생물을 배양하는 실험을 하였다. 처음 해야 할 과정은 auto clave에서 배양할 시험관을 소독하고, 조원 6명을 기준으로 agar 2.76g을 120ml증류수에 녹여 살균소독 하는 것이다.

그 다음 과정으로는 시험관에 백금니를 넣어 접종하기 위해서 agar를 붓고 그 agar가 굳기 전에 시험관을 15도 정도의 각도로 눕혀 접종공간을 넓히는 것이었다. 또한 시험관의 오염을 막기 위해서 시험관 입구와 면전을 화염살균하였는데 살균을 하고 나서도 입구을 손으로 만져 다시 화염살균을 하기도 하였다.

 

..<중략>..

 

㉡액체내 통기배양법(aerated culture)

산화발효 시킬 때, 산화세균, 효모 등의 균체를 다량으로 수확할 목적으로 배양할 때에 사용한다.

간단한 통기배양을 할 때에는 면여관(솜을 넣어 멸균한 유리관)을 써서, 흡인 또는 압인하여 공기를 무균하여 배양액을 통과시킨다.

㉢진탕배양법(shaking culture)

각종 배양병에 배지를 넣고 (500㎖ 배양병에 배양액은 100㎖ 이하) 이식후 배양기의 진탕기에 넣어 배양한다.

 

 

(실험결과):이번 실험은 시험관에 배지을 만들어 미생물을 배양하는 실험을 하였다. 처음 해야 할 과정은 auto clave에서 배양할 시험관을 소독하고, 조원 6명을 기준으로 agar 2.76g을 120ml증류수에 녹여 살균소독 하는 것이다.

그 다음 과정으로는 시험관에 백금니를 넣어 접종하기 위해서 agar를 붓고 그 agar가 굳기 전에 시험관을 15도 정도의 각도로 눕혀 접종공간을 넓히는 것이었다. 또한 시험관의 오염을 막기 위해서 시험관 입구와 면전을 화염살균하였는데 살균을 하고 나서도 입구을 손으로 만져 다시 화염살균을 하기도 하였다. agar을 다 굳힌 다음에는 백금니을 집어넣어 배지에 접종을 시도했는데 공간이 크지 않아 지그재그로 접종하는 것이 쉽지 만은 않았다. 배지가 파이기도 하고 시험관 벽에도 백금니가 닿아서 균을 배양했을 때 오염되지 않을까라는 걱정도 해보았다. auto clave가 작동되는 시간에는 한주 전에 실험하였던 순수배양을 연습하였다. 저번 순수배양에는 petri dish에 접종 후 뚜껑을 계속 열어나 배지 전체가 오염되어서 순수배양을 제대로 하지 못했다. 하지만 한번 실패한 경험을 토대로 평판배지에 신중하게 접종하여 제대로 된 배양 상태을 볼 수 있었다.

사면배양 실험 3일후, 시험관속의 배양한 균을 관찰해 보았는데 지그재그 모양으로 배양 되지 않고 지그재그 선이 끊겨서 따로따로 조금씩 배양되어 있었다. 그리고 예상했던 대로 시험관 벽쪽에 오염이 되어 있어서 시험관속의 배양상태을 사진으로 찍는 것은 어려웠다. 균을 접종할 때 백금니가 배지에 정확하게 다 닿지 않아서 부분적으로 끊긴 상태의 배양형태을 보이는 것 같다.

 

 

(토의)

 

●고체 배양법

 

㉠사면배양법(slant culture)

 

사면배지에 분리한 미생물을 백금선을 사용하여 한천표면의 아래서 위로 선을 긋는다. 이때 한천표면에 구멍이 파이지 않도록 주의한다. 이것을 적온의 배양기 속에 넣어 1~3일이 되면 집락이 발생한다.

 

㉡천자배양법(stab culture)

 

미생물의 생리적 특성(SIM배지에서 Indole이나 황화수소 생성)을 조사할 경우 부분적인 혐기조건을 만들어 주거나 생성된 기체의 확산을 막기 위해 접종하는 방법이다. 또한 순수분리된 세균을 고체 배지에 장기간 보관하고자 할 때 이용되는 방법 중 하나이다. 혐기미생물의 보존에도 많이 이용되고 있다.

균을 백금선에 채취한 후 이것을 응고한 한천배지위에서 아래로 수직으로 찌른 후 가만히 빼서 적온의 배양기에 넣는다. 가스가 생기면 구열이 생기고 젤라틴을 사용하여 균의 용해성 유무를 조사한다.

실험시 불꽃으로 살균한 접종침을 식히지 않고 사용할 경우, 배지가 녹게 되거나 세균이 사멸하므로 살균한 접종침을 충분히 식힌 후 사용한다.

 

●액체배양법(liquid culture)

 

생태생리의 관찰, 발효생산화합물의 분석 및 미생물 균체의 다량 수확 목적시 사용

 

㉠정치배양법(static culture)(시험관내 액체 배양법)

 

시험관에 멸균된 액체배지를 10㎖정도 넣고, 한 백금이의 미생물을 이식하여 적온의 배양기에서 배양한다.

증식의 유무, 균개, 피막, 침전물 형성 유무, 가스발생, 생산물 검출 반응, 배양액 혼탁도 등을 검사한다.

 

㉡액체내 통기배양법(aerated culture)

 

산화발효 시킬 때, 산화세균, 효모 등의 균체를 다량으로 수확할 목적으로 배양할 때에 사용한다.

간단한 통기배양을 할 때에는 면여관(솜을 넣어 멸균한 유리관)을 써서, 흡인 또는 압인하여 공기를 무균하여 배양액을 통과시킨다.

 

 

㉢진탕배양법(shaking culture)

 

각종 배양병에 배지를 넣고 (500㎖ 배양병에 배양액은 100㎖ 이하) 이식후 배양기의 진탕기에 넣어 배양한다.

 

 

 

 

(참고문헌)

-배무 외, 이영록 공역/최신미생물학/아카데미서적

-이종훈/병원미생물학/수문사

 

 

 

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